Kalveren zijn een unieke diersoort omdat ze afhankelijk zijn van biestinname om immuunbescherming te bieden tijdens de eerste levensmaanden. Zijn refractometers een nauwkeurige manier om snel en gemakkelijk de immuunoverdracht bij individuele kalveren te meten?

Voldoende biestopname is de belangrijkste bepalende factor voor de gezondheid, overleving, prestaties en winstgevendheid van het kalf. Passieve overdracht wordt vaak gebruikt om het fenomeen te beschrijven waarbij een kalf zijn immuniteit via biest van het moederdier verwerft.

Mijn kalveren hebben biest gekregen. Hoe kan ik nu controleren of mijn kalveren voldoende immuniteit hebben?

Veel producenten vragen zich vaak af of er visuele manieren zijn om te bepalen of een kalf niet slaagt voor passieve overdracht; meestal is het echter nodig om een bloedmonster te nemen, het monster te centrifugeren om serum te verzamelen en direct of indirect het IgG-niveau te meten.

De indirecte manier om IgG in het serum te meten is met een optische of digitale refractometer die het totale serumeiwit (STP) meet. Deze methode wordt beschouwd als een kuitkanttest, omdat het bloed op een bepaalde dag kan worden afgenomen, gecentrifugeerd en het serum op de refractometer kan worden geplaatst, zodat het resultaat op dat moment bekend is.

Omdat serum totaal eiwit gemakkelijk geanalyseerd kan worden en beschikbaar is op de boerderij, hebben veel producenten vertrouwd op deze test om het niveau van passieve overdracht bij kalveren te bepalen. Hoewel dit al vele jaren wordt gedaan en het wordt beschouwd als een nuttig hulpmiddel, zijn de resultaten vaak verkeerd geïnterpreteerd vanwege de beperkingen van de test.

Het is belangrijk om te begrijpen hoe een refractometer werkt en wat de samenstelling van het geteste serum is voordat je veel nadruk legt op gegevens van STP. Geloof het of niet, maar refractometers werden oorspronkelijk ontworpen voor gebruik in de wijn-, bier- en ahornsiroopindustrie om de hoeveelheid sacharose of suiker in water te meten. De refractometer zelf, of het nu een optische of digitale refractometer is, vertrouwt op een lichtbron en een prisma.
Brix-refractometers zijn gevalideerd voor gebruik op de boerderij om indirect het IgG-gehalte in zowel biest als serum te meten.

Bij kalveren die specifiek met maternale biest worden gevoed, is gebleken dat het totale serumeiwit een hoge correlatie heeft met de IgG-niveaus in het kalf en ook wordt gebruikt om mislukte passieve overdracht (FTP) vast te stellen.
De serumtest op totaal eiwit is echter niet bedoeld om de passieve overdrachtsstatus van individuele kalveren te bepalen.

De serumtest op totaal eiwit is niet bedoeld om vragen te beantwoorden over de status van passieve overdracht bij individuele kalveren. De juiste manier om deze test te gebruiken is op populatieniveau en om één vraag te beantwoorden: Werkt mijn biestmanagementprogramma of werkt het niet? Godden et al., 2008 beschrijft dit het best en geeft aan dat de resultaten moeten worden geïnterpreteerd op groepsbasis of op kuddebasis en een nauwkeurige weergave zullen zijn van het relatieve aandeel kalveren met FPT.

Hoe voer ik de test nauwkeurig uit en wat betekenen de resultaten?

Om het goed uit te voeren, moeten de serummonsters worden verzameld van ten minste 12 klinisch normale kalveren.
(zonder koorts of ademhalingsziekte) tussen 24 uur en 7 dagen leeftijd. Godden et al;, 2008 noemt ook twee afkapmethoden voor het bepalen van het aandeel kalveren met FTP, waarbij het ene doel is dat 80% of meer van de geteste kalveren 5,5 g/dL of meer moet zijn, of het andere doel dat 90% of meer van de geteste kalveren boven een afkapwaarde van 5,0 g/dL moet zijn.

Wanneer een onevenredig aantal kalveren FPT heeft, is het aan te raden om een onderzoek uit te voeren om problemen met het biestmanagementprogramma vast te stellen.

Verder zou dit kunnen betekenen dat de gouden standaardmethode voor het bepalen van de werkelijke IgG-concentratie in het serum wordt gebruikt, waarbij radiale immunodiffusietests (RID) worden uitgevoerd.

"...de juiste manier om deze test te gebruiken is op populatieniveau en om één vraag te beantwoorden: Werkt mijn biestmanagementprogramma of werkt het niet?"

Kan ik een refractometer gebruiken om mijn kalveren te testen na het voeren van biestvervangers?

Als een biestvervanger wordt gevoerd, moeten serumtests op totaal eiwit niet worden gebruikt om de status van passieve overdracht te bepalen, zelfs niet op populatieniveau. In een recent onderzoek uitgevoerd door Lopez et al. (2021) werd gekeken naar de nauwkeurigheid van het gebruik van serum-totaaleiwitten voor kalveren die van moeders biest kregen en kalveren die een biestvervanger op basis van biest kregen. Serum-IgG was onnauwkeurig of slecht gecorreleerd met serum-IgG bij kalveren die werden gevoed met een biestvervanger op basis van biest.

Omdat de resultaten zeer variabel en onnauwkeurig zijn, wordt het daarom niet aanbevolen om serum totaal eiwitten te gebruiken bij het monitoren of bepalen van de passieve niveaustatus bij kalveren die biestvervangers krijgen. In plaats daarvan wordt aanbevolen om radiale immunodiffusietests uit te voeren.

Welke andere factoren kunnen het totale serumeiwitgehalte beïnvloeden en de resultaten van testen met een refractometer veranderen?

Het is ook belangrijk om rekening te houden met de samenstelling van serum en enkele beperkingen van wat er in het serum wordt getest. Als we de status van passieve overdracht proberen te begrijpen op basis van het totale serumeiwit, moeten we de volgende aannames onthouden:

1. Colostrum bevat ongeveer 50% eiwitten (waarvan tot de helft IgG1).
2. Alle colostrum-eiwitten worden niet-selectief opgenomen in de bloedbaan (niet alleen IgG).
3. Kalveren die grote hoeveelheden biest zuigen, kunnen geïdentificeerd worden door het serum totaal eiwitgehalte te meten en kalveren met een hoog totaal eiwitgehalte hebben een hoog IgG1 gehalte. Hoewel dit enigszins correct is, is het ook belangrijk om te onthouden dat het totale serumeiwitgehalte wordt gemeten na de biestinname.

Het serum totaal eiwit wordt daarom ook beïnvloed door het volgende:

1. Niveaus van serumeiwitten
2. Hoeveelheid opgenomen eiwit (zoals beschreven onder 1). Hoe meer colostrum er wordt opgenomen, hoe meer eiwit er wordt opgenomen
3. Hoe hoger het IgG-niveau in colostrum, hoe hoger de serumeiwitten.
4. Timing van bloedafname.

Wat betreft de niveaus van serumeiwitten vóór de biestinname, hebben sommige biestgevoede kalveren een lager totaal eiwitgehalte dan biestarme kalveren (Tennant et al AJVR 1969 30: 345), waarschijnlijk door verschillen in albumineconcentraties die kunnen variëren van 1,9-3,4 g/100 ml bij eendagskalveren (Schultz et al 1971, 35:93). Dit is voor een groot deel de reden waarom het serum totaal eiwit van kalveren hoog kan zijn, zelfs vóór de biestinname.

De onderstaande figuur geeft een overzicht van de vele andere eiwitten in serum. Net als bij het meten van het totale vaste stofgehalte van biest, gaat het meten van de totale eiwitten in kalfsserum ervan uit dat als het serumeiwit hoog is, het serum IgG hoog is en omgekeerd. Maar omdat IgG slechts één component is (en niet de hoofdcomponent), hebben veranderingen in de andere fracties ook invloed op het totale serumeiwitgehalte. Met andere woorden, als bijvoorbeeld een kalf geboren wordt met een aanvankelijk hoger albuminegehalte, kan het totale serumeiwitgehalte hoger zijn en is IgG mogelijk niet indicatief voor het hogere eiwitgehalte.

Samengevat is het belangrijk om de immuunstatus van onze kalveren te meten, maar de meest praktische en nauwkeurige manier om dit te doen is op kuddeniveau. In plaats van gefixeerd te raken op het resultaat van één individueel kalf, moeten we ons afvragen: heb ik gezonde kalveren? Door de immuunoverdracht op kuddeniveau te bekijken, kunnen we inzicht krijgen in het biestprogramma en de gezondheidsstatus van onze kalveren.

Testen op totaal eiwit in serum

Mike Nagorske, DVM.

Directeur Onderzoek, SCCL
[email protected]